Preparación del tampón TBE
Esta guía describe la preparación de un tampón Tris-borato-EDTA a una molaridad definida para uso en laboratorio.
El tampón Tris-borato-EDTA (TBE) se utiliza habitualmente en electroforesis para el análisis de ácidos nucleicos, especialmente para separar fragmentos pequeños de ADN.
Tampón Tris-borato-EDTA (TBE) – Composición de la solución de trabajo 1X
| Nombre | Fórmula | Concentración (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 89 mM | 77-86-1 |
| Borato | H₃BO₃ | 89 mM | 10043-35-3 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 2 mM | 60-00-4 |
Aplicaciones del tampón Tris-borato-EDTA (TBE)
El tampón TBE se utiliza ampliamente para la electroforesis de ADN en geles de agarosa y poliacrilamida. En comparación con TAE, proporciona mayor capacidad tamponante y un pH más estable durante electroforesis prolongadas. Ofrece mejor resolución para fragmentos pequeños de ADN y se utiliza habitualmente para determinar tamaños de ADN, analizar fragmentos de restricción y realizar electroforesis de alta resolución.
Consejos de preparación, esterilización y conservación
- Se recomienda utilizar una solución de EDTA o EDTA·2Na·2H₂O.
- Algunos estudios han mostrado que los tampones preparados con EDTA (ácido libre) generan menos calor durante la electroforesis, pero requieren más tiempo de preparación.
- El EDTA (ácido libre) es extremadamente difícil de disolver. Se recomienda preparar primero una solución madre de EDTA.
- Si se forma una pequeña cantidad de precipitado, puede redisolverse colocando la solución en un baño de agua a 37°C, sin afectar a su uso. Si persiste el precipitado después del tratamiento, desechar la solución.
- Esterilización: normalmente no es necesaria; elegir según las necesidades.
- Conservación: temperatura ambiente.
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