Preparo do tampão PBS

Este guia descreve o preparo de uma solução salina tamponada com fosfato em uma molaridade definida para uso em laboratório.

A solução salina tamponada com fosfato (PBS) é um tampão biológico amplamente usado em laboratórios de pesquisa, isotônico e compatível com a maioria das células, com pH próximo às condições fisiológicas.

Solução salina tamponada com fosfato (PBS) – Composição da solução de trabalho 1X

NomeFórmulaConcentração (1X)CAS
Cloreto de sódioNaCl137 mM7647‑14‑5
Cloreto de potássioKCl2.7 mM7447‑40‑7
Fosfato monopotássicoKH₂PO₄1.8 mM7778‑77‑0
Fosfato dissódicoNa₂HPO₄10 mM7558‑79‑4
Cloreto de magnésio (opcional)MgCl₂0.5 mM7786-30-3
Cloreto de cálcio (opcional)CaCl₂1 mM10043‑52‑4

Usos comuns do PBS

O PBS é amplamente usado em biologia molecular e cultura celular porque é isotônico e não tóxico para a maioria das células. Suas aplicações incluem lavagem de células ou tecidos, diluição de amostras biológicas, preparo de reagentes, enxágue de recipientes, imunoensaios e procedimentos de biologia molecular. O PBS também é usado para manter o equilíbrio osmótico em experimentos.

Dicas de preparo, esterilização e armazenamento

  • O pH da solução de PBS 10X é 6.8. Quando diluída para 1X, o pH passa a 7.4.
  • Após o preparo com água Milli-Q, o PBS 1X geralmente atinge pH 7.2–7.4 sem ajuste.
  • Se for necessário um controle rigoroso do pH, medi-lo e ajustá-lo após a diluição.
  • Armazenar PBS concentrado a 4°C pode causar precipitação de sais. Agitar bem antes do uso; descartar se as partículas persistirem.
  • O fosfato dissódico é altamente higroscópico; evitar exposição prolongada durante a pesagem.
  • O cloreto de cálcio e o cloreto de magnésio são opcionais; adicionar conforme as necessidades experimentais.
  • CaCl₂ e MgCl₂ anidros geram calor ao se dissolverem; manusear com cuidado.
  • Esterilização: filtração de 0.22 μm ou autoclavagem.
  • Armazenamento: temperatura ambiente ou 4°C.
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