Preparo do tampão PBS
Este guia descreve o preparo de uma solução salina tamponada com fosfato em uma molaridade definida para uso em laboratório.
A solução salina tamponada com fosfato (PBS) é um tampão biológico amplamente usado em laboratórios de pesquisa, isotônico e compatível com a maioria das células, com pH próximo às condições fisiológicas.
Solução salina tamponada com fosfato (PBS) – Composição da solução de trabalho 1X
| Nome | Fórmula | Concentração (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Cloreto de sódio | NaCl | 137 mM | 7647‑14‑5 |
| Cloreto de potássio | KCl | 2.7 mM | 7447‑40‑7 |
| Fosfato monopotássico | KH₂PO₄ | 1.8 mM | 7778‑77‑0 |
| Fosfato dissódico | Na₂HPO₄ | 10 mM | 7558‑79‑4 |
| Cloreto de magnésio (opcional) | MgCl₂ | 0.5 mM | 7786-30-3 |
| Cloreto de cálcio (opcional) | CaCl₂ | 1 mM | 10043‑52‑4 |
Usos comuns do PBS
O PBS é amplamente usado em biologia molecular e cultura celular porque é isotônico e não tóxico para a maioria das células. Suas aplicações incluem lavagem de células ou tecidos, diluição de amostras biológicas, preparo de reagentes, enxágue de recipientes, imunoensaios e procedimentos de biologia molecular. O PBS também é usado para manter o equilíbrio osmótico em experimentos.
Dicas de preparo, esterilização e armazenamento
- O pH da solução de PBS 10X é 6.8. Quando diluída para 1X, o pH passa a 7.4.
- Após o preparo com água Milli-Q, o PBS 1X geralmente atinge pH 7.2–7.4 sem ajuste.
- Se for necessário um controle rigoroso do pH, medi-lo e ajustá-lo após a diluição.
- Armazenar PBS concentrado a 4°C pode causar precipitação de sais. Agitar bem antes do uso; descartar se as partículas persistirem.
- O fosfato dissódico é altamente higroscópico; evitar exposição prolongada durante a pesagem.
- O cloreto de cálcio e o cloreto de magnésio são opcionais; adicionar conforme as necessidades experimentais.
- CaCl₂ e MgCl₂ anidros geram calor ao se dissolverem; manusear com cuidado.
- Esterilização: filtração de 0.22 μm ou autoclavagem.
- Armazenamento: temperatura ambiente ou 4°C.
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