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储备溶液配制指南 —— L‑谷氨酰胺(200 mM)
L‑谷氨酰胺是细胞培养中重要的氨基酸成分,为细胞提供能量和氮源。它易溶于水或 0.85% 生理盐水,但溶液不稳定,会分解成有毒的氨。因此通常配制成高浓度储备液,过滤灭菌后分装、冷冻保存。
实验目的
配制 100 mL 200 mM L‑谷氨酰胺水溶液或 0.85% 生理盐水溶液。
溶液组成
- 200 mM L‑谷氨酰胺(C5H10N2O3)水溶液或 0.85% 生理盐水溶液
实验材料
- L‑谷氨酰胺粉末(分析或细胞培养级)
- 细胞培养级水(Milli‑Q)或 0.85% 生理盐水
- 250 mL 烧杯或锥形瓶
- 量筒或定容瓶
- 磁力搅拌器或玻璃棒
- 0.22 µm 注射器过滤器及无菌容器
- 个人防护装备(手套、护目镜、实验服)
操作步骤
- 步骤 1
称取 **2.92 g** L‑谷氨酰胺加入约 **90 mL** 细胞培养级水或 0.85% 生理盐水中。 - 步骤 2
使用磁力搅拌器或玻璃棒搅拌至溶解,溶液清澈透明。 - 步骤 3
将溶液转移至量筒或定容瓶,用同种溶剂定容至 **100 mL**。 - 步骤 4
通过 **0.22 µm** 无菌过滤器过滤灭菌(勿高压灭菌)。
储存: 将无菌溶液分装成小份(如 5 mL),置于 **–20 °C** 冷冻保存,可稳定数月。
可用试剂
| 名称 | 分子式 | 分子量 | CAS |
|---|---|---|---|
| L‑谷氨酰胺 | C5H10N2O3 | 146.14 | 56‑85‑9 |
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