Herstellung einer Natriumacetat-Stammlösung

Anleitung zur Herstellung einer Stammlösung – 3 M Natriumacetatpuffer (C₂H₃O₂Na), pH 5.2

Natriumacetat ist ein Natriumsalz der Essigsäure, das sich leicht in Wasser löst. Sowohl wasserfreie als auch hydratisierte Formen können zur Herstellung eines hochkonzentrierten Puffers verwendet werden. Ein 3 M Natriumacetatpuffer (pH 5.2) wird in der Molekularbiologie häufig zur Nukleinsäurefällung und für weitere Anwendungen eingesetzt.

Ziel

Herstellung von 100 mL eines 3 M Natriumacetatpuffers bei pH 5.2.

Zusammensetzung

• 3 M Natriumacetatpuffer (pH 5.2)

Benötigte Materialien

• Wasserfreies Natriumacetat oder Natriumacetat-Trihydrat
• Eisessig (zur pH-Einstellung)
• Deionisiertes oder destilliertes Wasser
• Analysenwaage
• Becherglas oder Erlenmeyerkolben
• Messkolben oder Messzylinder
• Rührstab oder Magnetrührer
• pH-Meter oder pH-Indikator
• Persönliche Schutzausrüstung (Handschuhe, Schutzbrille, Laborkittel)

Durchführung

• Schritt 1
  Die entsprechende Menge Natriumacetat genau einwiegen. Für 100 mL eines 3 M Puffers mit **wasserfreiem Natriumacetat (Molekülmasse = 82.03)** **24.61 g** einwiegen. Bei Verwendung des Trihydrats (Molekülmasse = 136.08) proportional mehr einwiegen (~40.82 g).
• Schritt 2
  Den eingewogenen Feststoff in ein Becherglas mit ~80 mL deionisiertem/destilliertem Wasser geben und bis zur vollständigen Auflösung rühren.
• Schritt 3
  Den pH durch tropfenweise Zugabe von Eisessig unter Rühren auf **5.2** einstellen und bei Raumtemperatur mit einem kalibrierten pH-Meter kontrollieren.
• Schritt 4
  Die Lösung in einen 100 mL-Messkolben überführen, das Becherglas mit Wasser in den Kolben ausspülen und mit deionisiertem Wasser auf **100 mL** Endvolumen auffüllen. Gründlich mischen.
• Schritt 5 (optional)
  Bei Bedarf für biologische Anwendungen autoklavieren oder durch eine **0.22 µm**-Membran filtrieren.

Hinweis: Wasserfreies Natriumacetat ist hygroskopisch und kann Wasser aus der Luft aufnehmen, was genaues Einwiegen erschwert; für höhere Präzision die Trihydratform erwägen. Den Behälter mit Konzentration, pH und Datum beschriften. Den Puffer bei Raumtemperatur lagern.

Verfügbare Reagenzien