Preparación del tampón HBS
Esta guía describe la preparación de una solución salina tamponada con HEPES (HBS) a una molaridad definida para uso en laboratorio.
La solución salina tamponada con HEPES (HBS) se utiliza habitualmente en experimentos de transfección y aplicaciones de cultivo celular.
Solución salina tamponada con HEPES (HBS) – Composición
| Nombre | Fórmula | Concentración | CAS |
|---|---|---|---|
| Cloruro de sodio | NaCl | 135 mM | 7647-14-5 |
| Cloruro de potasio | KCl | 5 mM | 7447-40-7 |
| Fosfato disódico | Na₂HPO₄ | 750 µM | 7558-79-4 |
| Glucosa | C₆H₁₂O₆ | 5 mM | 50-99-7 |
| HEPES | C₈H₁₈N₂O₄S | 20 mM | 7365-45-9 |
Esterilización y almacenamiento
- Esterilización: filtración de 0.22 μm.
- Almacenamiento: dividir en alícuotas y almacenar a −20 °C.
Consejos
- Antes de usarla en experimentos de transfección, probar la preparación mezclando 0.5 mL del tampón con 0.5 mL de CaCl₂ a 250 mM y agitando en vórtex. Debe formarse un precipitado fino visible al microscopio. Si no se forma precipitado, no utilizar este lote para transfección.
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