Herstellung des Puffers HBS
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung einer HEPES-gepufferten Salzlösung (HBS) mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
HEPES-gepufferte Salzlösung (HBS) wird häufig bei Transfektionsexperimenten und in Zellkulturanwendungen verwendet.
HEPES-gepufferte Salzlösung (HBS) – Zusammensetzung
| Name | Formel | Konzentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Natriumchlorid | NaCl | 135 mM | 7647-14-5 |
| Kaliumchlorid | KCl | 5 mM | 7447-40-7 |
| Dinatriumhydrogenphosphat | Na₂HPO₄ | 750 µM | 7558-79-4 |
| Glucose | C₆H₁₂O₆ | 5 mM | 50-99-7 |
| HEPES | C₈H₁₈N₂O₄S | 20 mM | 7365-45-9 |
Sterilisation und Lagerung
- Sterilisation: Filtration mit 0.22 μm.
- Lagerung: Aliquotieren und bei −20 °C lagern.
Hinweise
- Vor dem Einsatz in Transfektionsexperimenten die Zubereitung testen: 0.5 mL Puffer mit 0.5 mL 250 mM CaCl₂ mischen und vortexen. Ein feines, unter dem Mikroskop sichtbares Präzipitat sollte entstehen. Bildet sich kein Präzipitat, diese Charge nicht für die Transfektion verwenden.
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