Preparación del tampón MOPS
Esta guía describe la preparación de un tampón MOPS a una molaridad definida para uso en laboratorio.
El tampón MOPS es un sistema tampón zwitteriónico utilizado habitualmente en biología molecular, especialmente en aplicaciones relacionadas con el ARN, por su capacidad tamponadora eficaz cerca del pH neutro y su baja afinidad por los metales.
Tampón MOPS – Composición de la solución de trabajo 1X
| Nombre | Fórmula | Concentración (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| MOPS | C₇H₁₅NO₄S | 20 mM | 1132-61-2 |
| Acetato de sodio | C₂H₃O₂Na | 5 mM | 127-09-3 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60-00-4 |
Aplicaciones del tampón MOPS
El tampón MOPS se utiliza ampliamente en biología molecular, especialmente para electroforesis de ARN (como en geles de agarosa desnaturalizantes), manipulación de ARN y reacciones enzimáticas que requieren una capacidad tamponadora estable cerca de pH 7.0. Su mínima interacción con iones metálicos y su baja absorbancia UV lo hacen adecuado para aplicaciones bioquímicas y de ácidos nucleicos sensibles.
Consejos de preparación, esterilización y almacenamiento
- Antes de ajustar el pH, medirlo solo después de que todos los componentes se hayan disuelto por completo. Normalmente se utiliza NaOH al preparar con MOPS en forma de ácido libre y ácido acético al preparar con la sal sódica de MOPS.
- No se recomienda autoclavar, ya que las altas temperaturas pueden hacer que la solución se vuelva amarilla.
- Las soluciones recién preparadas son incoloras y transparentes. Una coloración amarilla pálida con el tiempo no afecta a su uso; desechar la solución si el color se oscurece.
- El acetato de sodio anhidro es higroscópico. Evitar la exposición prolongada durante el pesaje.
- El EDTA (ácido libre) es extremadamente difícil de disolver y requiere condiciones alcalinas. Se recomienda preparar una solución madre de EDTA; se prefiere una solución de EDTA o EDTA·2Na·2H₂O.
- Para aplicaciones con ARN, realizar tratamiento con DEPC durante todo el proceso de preparación.
- Esterilización: filtración de 0.22 μm.
- Almacenamiento: a 4°C en un frasco ámbar.
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