Preparo do tampão MOPS

O tampão MOPS é um sistema tampão zwitteriônico comumente usado em biologia molecular, particularmente em aplicações relacionadas ao RNA, devido à sua capacidade tamponante eficaz próxima ao pH neutro e à sua baixa capacidade de ligação a metais.

Tampão MOPS – Composição da solução de trabalho 1X

Aplicações do tampão MOPS

O tampão MOPS é amplamente usado em biologia molecular, particularmente para eletroforese de RNA (como em géis de agarose desnaturantes), manuseio de RNA e reações enzimáticas que exigem tamponamento estável próximo ao pH 7.0. Sua interação mínima com íons metálicos e baixa absorbância UV o tornam adequado para aplicações bioquímicas e de ácidos nucleicos sensíveis.

Dicas de preparo, esterilização e armazenamento

• Antes de ajustar o pH, medi-lo somente após a dissolução completa de todos os componentes. Normalmente, usar NaOH ao preparar com MOPS na forma de ácido livre e ácido acético ao preparar com o sal sódico de MOPS.
• A autoclavagem não é recomendada, pois temperaturas altas podem deixar a solução amarela.
• Soluções recém-preparadas são incolores e transparentes. Uma coloração amarelo-pálida com o tempo não afeta o uso; descartar a solução se a cor escurecer.
• O acetato de sódio anidro é higroscópico. Evitar exposição prolongada durante a pesagem.
• O EDTA (ácido livre) é extremamente difícil de dissolver e requer condições alcalinas. Recomenda-se preparar uma solução estoque de EDTA; dar preferência à solução de EDTA ou ao EDTA·2Na·2H₂O.
• Para aplicações com RNA, realizar tratamento com DEPC durante todo o processo de preparo.
• Esterilização: filtração de 0.22 μm.
• Armazenamento: a 4°C em frasco âmbar.