Preparación de la solución II para aislamiento de plásmidos
Esta guía describe la preparación de la solución II (aislamiento de plásmidos) a una molaridad definida para uso en laboratorio.
La solución II es el tampón de lisis alcalina utilizado para lisar las células bacterianas durante el aislamiento de plásmidos.
Solución II (aislamiento de plásmidos) – Composición
| Nombre | Fórmula | Concentración | CAS |
|---|---|---|---|
| Hidróxido de sodio | NaOH | 0.2 N | 1310-73-2 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 1% (w/v) | 151-21-3 |
Función de la solución II
La solución II se utiliza para lisar las células bacterianas mediante la desnaturalización alcalina del ADN cromosómico y las proteínas, manteniendo intacto el ADN plasmídico. El SDS ayuda a solubilizar los lípidos y las proteínas de membrana.
Consejos de preparación, esterilización y conservación
- El período de conservación de esta solución preferiblemente no debe superar un mes.
- El SDS genera espuma fácilmente. Al añadir agua, dejarla fluir lentamente por la pared del recipiente para reducir la espuma y evitar la agitación vigorosa.
- El SDS puede formar precipitados floculentos a bajas temperaturas; asegurarse de que esté completamente disuelto antes de usarlo.
- Esterilización: normalmente no es necesaria; elegir según las necesidades.
- Conservación: temperatura ambiente.
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