Preparo da solução II para isolamento de plasmídeos
Este guia descreve o preparo da solução II (isolamento de plasmídeos) em uma molaridade definida para uso em laboratório.
A solução II é o tampão de lise alcalina usado para lisar células bacterianas durante o isolamento de plasmídeos.
Solução II (isolamento de plasmídeos) – Composição
| Nome | Fórmula | Concentração | CAS |
|---|---|---|---|
| Hidróxido de sódio | NaOH | 0.2 N | 1310-73-2 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 1% (w/v) | 151-21-3 |
Função da solução II
A solução II é usada para lisar células bacterianas por desnaturação alcalina do DNA cromossômico e das proteínas, mantendo o DNA plasmidial intacto. O SDS ajuda a solubilizar lipídios e proteínas de membrana.
Dicas de preparo, esterilização e armazenamento
- O período de armazenamento desta solução preferencialmente não deve ultrapassar um mês.
- O SDS forma espuma facilmente. Ao adicionar água, deixe-a escorrer lentamente pela parede do recipiente para minimizar a espuma e evite agitação vigorosa.
- O SDS pode formar precipitados floculentos em baixas temperaturas; confirme a dissolução completa antes do uso.
- Esterilização: geralmente desnecessária; escolher conforme a necessidade.
- Armazenamento: temperatura ambiente.
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