Préparation d'une solution mère de L-glutamine

Guide de préparation des solutions mères – L‑glutamine (200 mM)

La L‑glutamine est un acide aminé essentiel utilisé comme nutriment et source d’azote dans les milieux de culture cellulaire. Elle est soluble dans l’eau et les solutions salines, mais instable en solution ; elle se dégrade avec le temps en ammoniac, qui peut être toxique pour les cellules. Il convient donc de préparer des solutions mères concentrées, de les stériliser par filtration, de les répartir en aliquotes et de les conserver congelées jusqu’à utilisation.

Objectif

Préparation de 100 mL de solution de L‑glutamine à 200 mM dans l’eau ou une solution saline à 0.85%.

Composition

• Solution de L‑glutamine à 200 mM (C₅H₁₀N₂O₃) dans de l’eau de qualité culture cellulaire ou une solution saline à 0.85%

Matériel nécessaire

• L‑glutamine en poudre (qualité analytique ou culture cellulaire)
• Eau de qualité culture cellulaire (Milli‑Q) ou solution saline à 0.85%
• Bécher ou Erlenmeyer de 250 mL
• Éprouvette graduée ou fiole jaugée
• Agitateur magnétique ou baguette en verre
• Filtre pour seringue stérile de 0.22 µm et récipient stérile
• Équipement de protection individuelle (gants, lunettes, blouse)

Procédure

• Étape 1
  Peser **2.92 g de L‑glutamine** et transférer dans un bécher ou un Erlenmeyer de 250 mL contenant **~90 mL** d’eau de qualité culture cellulaire ou de solution saline à 0.85%.
• Étape 2
  Agiter la solution avec un agitateur magnétique ou une baguette en verre jusqu’à dissolution complète de la L‑glutamine et obtention d’une solution limpide.
• Étape 3
  Transférer la solution dissoute dans une fiole jaugée ou une éprouvette graduée et ajuster le volume final à **100 mL** avec le même solvant (eau ou solution saline à 0.85%).
• Étape 4
  Stériliser la solution par filtration sur une membrane de **0.22 µm** dans un récipient stérile pour garantir la stérilité (ne pas autoclaver).

Conservation : Répartir la solution stérile dans de petits tubes (p. ex., 5 mL) et conserver à **–20 °C**. La solution mère congelée est stable pendant plusieurs mois.

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