Herstellung des NP-40-Lysepuffers
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung eines NP-40-Lysepuffers mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
NP-40-Lysepuffer wird häufig zur Zelllyse und Proteinextraktion verwendet.
NP-40-Lysepuffer – Zusammensetzung
| Name | Formel | Konzentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 8.0) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| Natriumchlorid | NaCl | 150 mM | 7647-14-5 |
| NP-40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027-38-3 |
Sterilisation und Lagerung
- Sterilisation: Filtration mit 0.22 μm oder Autoklavieren
- Lagerung: Raumtemperatur
Hinweise
- Verschiedene Protease- und Phosphataseinhibitoren können bei Bedarf zugesetzt werden. Puffer mit Inhibitoren sollten bei −20°C gelagert werden.
- PMSF innerhalb weniger Minuten vor Gebrauch bis zu einer Endkonzentration von 1 mM zugeben.
- Triton X-100 kann auch als Ersatz für NP-40 verwendet werden.
- Falls autoklaviert wird, NP-40 nach der Sterilisation zugeben.
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