Preparación del tampón de corrida SDS-PAGE
Esta guía describe la preparación de un tampón de corrida para SDS-PAGE a una molaridad definida para uso en laboratorio.
El tampón de corrida para SDS-PAGE es un tampón de electroforesis estándar utilizado en sistemas Laemmli para separar proteínas en condiciones desnaturalizantes.
Tampón de corrida para SDS-PAGE – Composición de la solución de trabajo 1X
| Nombre | Fórmula | Concentración (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| Glicina | NH₂CH₂COOH | 192 mM | 56-40-6 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 0.1% (w/v) | 151-21-3 |
Aplicaciones del tampón de corrida para SDS-PAGE
El tampón de corrida para SDS-PAGE se utiliza para la electroforesis de proteínas en condiciones desnaturalizantes. En combinación con tampón de muestra que contiene SDS y geles de poliacrilamida, permite que las proteínas migren principalmente según su peso molecular al mantener una relación uniforme entre carga negativa y masa.
Consejos de preparación, esterilización y almacenamiento
- El pH de la solución debe ser 8.3 y no requiere ningún ajuste.
- El SDS genera espuma con facilidad. Al añadir agua, dejarla fluir lentamente por la pared del recipiente para minimizar la formación de espuma y evitar la agitación vigorosa.
- El SDS puede formar precipitados floculentos a bajas temperaturas. Asegurarse de que esté completamente disuelto antes del uso.
- Esterilización: generalmente no es necesaria; decidir según las necesidades.
- Almacenamiento: temperatura ambiente.
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