Herstellung des SDS-PAGE-Laufpuffers
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung eines SDS-PAGE-Laufpuffers mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
SDS-PAGE-Laufpuffer ist ein Standard-Elektrophoresepuffer, der in Laemmli-Systemen zur Proteintrennung unter denaturierenden Bedingungen verwendet wird.
SDS-PAGE-Laufpuffer – Zusammensetzung der 1X-Arbeitslösung
| Name | Formel | Konzentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Base | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| Glycin | NH₂CH₂COOH | 192 mM | 56-40-6 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 0.1% (w/v) | 151-21-3 |
Anwendungen von SDS-PAGE-Laufpuffer
SDS-PAGE-Laufpuffer wird zur Proteinelektrophorese unter denaturierenden Bedingungen verwendet. Zusammen mit SDS-haltigem Probenpuffer und Polyacrylamidgelen ermöglicht er eine vorwiegend vom Molekulargewicht abhängige Proteinmigration, indem er ein einheitliches Verhältnis von negativer Ladung zu Masse aufrechterhält.
Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung
- Der pH-Wert der Lösung sollte 8.3 betragen und muss nicht eingestellt werden.
- SDS bildet leicht Schaum. Wasser beim Zugeben langsam an der Gefäßwand entlanglaufen lassen, um die Schaumbildung zu minimieren, und kräftiges Rühren vermeiden.
- SDS kann bei niedrigen Temperaturen flockige Präzipitate bilden. Vor Gebrauch sicherstellen, dass es vollständig gelöst ist.
- Sterilisation: In der Regel nicht erforderlich; nach Bedarf entscheiden.
- Lagerung: Raumtemperatur.
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