Préparation du tampon de migration SDS-PAGE
Ce guide décrit la préparation d'un tampon de migration pour SDS-PAGE à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le tampon de migration SDS-PAGE est un tampon d’électrophorèse standard utilisé dans les systèmes de Laemmli pour séparer les protéines en conditions dénaturantes.
Tampon de migration SDS-PAGE – Composition de la solution de travail 1X
| Nom | Formule | Concentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| Glycine | NH₂CH₂COOH | 192 mM | 56-40-6 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 0.1% (w/v) | 151-21-3 |
Applications du tampon de migration SDS-PAGE
Le tampon de migration SDS-PAGE est utilisé pour l’électrophorèse des protéines en conditions dénaturantes. Associé à un tampon d’échantillon contenant du SDS et à des gels de polyacrylamide, il permet aux protéines de migrer principalement selon leur masse moléculaire en maintenant un rapport uniforme entre charge négative et masse.
Conseils de préparation, stérilisation et conservation
- Le pH de la solution doit être de 8.3 et ne nécessite aucun ajustement.
- Le SDS mousse facilement. Lors de l’ajout d’eau, la laisser couler lentement le long de la paroi du récipient pour limiter la formation de mousse et éviter une agitation vigoureuse.
- Le SDS peut former des précipités floconneux à basse température. Vérifier sa dissolution complète avant utilisation.
- Stérilisation : généralement non nécessaire ; décider selon les besoins.
- Conservation : température ambiante.
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