Preparación de solución madre de ATP
Esta guía describe la preparación de una solución madre de ATP a una molaridad definida para uso en laboratorio.
Guía de preparación de soluciones madre – ATP (sal disódica)
La sal disódica de ATP (sal disódica de adenosina 5′-trifosfato) es la forma biológicamente activa del ATP utilizada habitualmente como sustrato energético en ensayos enzimáticos, estudios del metabolismo celular y aplicaciones de biología molecular. Participa en reacciones de fosforilación y actúa como moneda energética universal de las células.
Información química
- Número CAS: 987-65-5
- Fórmula molecular: C10H14N5O13P3Na2
- Masa molar: 551.14 g/mol
- Nombre: Sal disódica de ATP
Solubilidad y manipulación
La sal disódica de ATP es fácilmente soluble en agua (p. ej., ≥ 50 mg/mL) y forma una solución transparente adecuada para preparar tampones y ensayos enzimáticos.
- Prepare la solución madre de ATP en agua purificada; el calentamiento y la agitación suave pueden facilitar la disolución.
- Las soluciones de ATP son sensibles a la hidrólisis, especialmente a temperaturas elevadas o pH extremos. Evite el almacenamiento prolongado a temperatura ambiente.
Preparación de la solución madre
A continuación se muestra un ejemplo de preparación de una solución madre de ATP de 100 mM:
• Pese 55.114 g de sal disódica de ATP.
• Añada a ~800 mL de agua desionizada y disuelva por completo.
• Ajuste el pH si es necesario (p. ej., pH 7.0–7.5) con NaOH o HCl.
• Complete hasta un volumen final de 1 L con agua desionizada.
Una vez disuelta, divida la solución madre de ATP en alícuotas y consérvela a −20°C o menos para minimizar la degradación y evitar ciclos repetidos de congelación–descongelación.
Conservación y uso
- Conserve la sal disódica de ATP sólida a −20°C con desecante.
- Las soluciones madre de ATP pueden conservarse a −20°C durante semanas o meses; evite la congelación–descongelación frecuente.
- Utilice técnicas estériles para aplicaciones en cultivo celular o enzimáticas.
