Préparation d'une solution mère de ATP
Ce guide décrit la préparation d'une solution mère d'ATP à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Guide de préparation des solutions mères – ATP (sel disodique)
Le sel disodique d’ATP (sel disodique d’adénosine 5′-triphosphate) est la forme biologiquement active de l’ATP couramment utilisée comme substrat énergétique dans les dosages enzymatiques, les études du métabolisme cellulaire et les applications de biologie moléculaire. Il participe aux réactions de phosphorylation et sert de monnaie énergétique universelle dans les cellules.
Informations chimiques
- Numéro CAS : 987-65-5
- Formule moléculaire : C10H14N5O13P3Na2
- Masse molaire : 551.14 g/mol
- Nom : Sel disodique d’ATP
Solubilité et manipulation
Le sel disodique d’ATP se dissout facilement dans l’eau (p. ex., ≥ 50 mg/mL), formant une solution limpide adaptée à la préparation de tampons et de dosages enzymatiques.
- Préparer la solution mère d’ATP dans de l’eau purifiée ; un réchauffement et une agitation douce peuvent faciliter la dissolution.
- Les solutions d’ATP sont sensibles à l’hydrolyse, surtout à température élevée ou à pH extrême. Éviter une conservation prolongée à température ambiante.
Préparation de la solution mère
Voici un exemple de préparation d’une solution mère d’ATP à 100 mM :
• Peser 55.114 g de sel disodique d’ATP.
• Ajouter à ~800 mL d’eau déionisée et dissoudre complètement.
• Ajuster le pH si nécessaire (p. ex., pH 7.0–7.5) avec NaOH ou HCl.
• Compléter à un volume final de 1 L avec de l’eau déionisée.
Après dissolution, répartir en aliquotes et conserver la solution mère d’ATP à −20°C ou moins pour limiter la dégradation et éviter les cycles répétés de congélation–décongélation.
Conservation et utilisation
- Conserver le sel disodique d’ATP solide à −20°C avec un dessiccant.
- Les solutions mères d’ATP peuvent être conservées à −20°C pendant des semaines à des mois ; éviter les congélations–décongélations fréquentes.
- Utiliser une technique stérile pour les applications de culture cellulaire ou enzymatiques.
