Préparation du tampon de transfert Tris-glycine
Ce guide décrit la préparation d'un tampon de transfert Tris-glycine à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le tampon de transfert Tris-glycine est couramment utilisé pour le transfert des protéines en Western blot.
Tampon de transfert Tris-glycine – Composition
| Nom | Formule | Concentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| Glycine | NH₂CH₂COOH | 192 mM | 56-40-6 |
| Méthanol | CH₃OH | 20% (v/v) | 67-56-1 |
Stérilisation et conservation
- Stérilisation : généralement non nécessaire, facultative
- Conservation : température ambiante
Conseils
- Le pH de la solution doit être de 8.3 et ne nécessite aucun ajustement.
- À la concentration 1X, la solution doit contenir 20% (v/v) de méthanol, proportion ajustable selon la taille des protéines ; en ajouter la quantité correspondante.
- Pour les grandes protéines, augmenter la quantité de SDS (concentration de travail habituelle : 0.025–0.1% w/v) et réduire le méthanol ; pour les petites protéines, faire l'inverse.
- Une cristallisation peut se produire lorsque le concentré 10X est conservé à une température ambiante basse. Réchauffer au bain-marie à 37°C jusqu'à dissolution complète avant dilution et utilisation.
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