氯化钾基PCR缓冲液制备指南

本指南介绍了如何制备实验室使用的特定摩尔浓度的 氯化钾基PCR缓冲液。

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基于氯化钾的PCR缓冲液用于优化DNA聚合酶活性。

基于氯化钾的PCR缓冲液 – 成分

名称分子式浓度CAS号
Tris-Cl (pH 9.0)C₄H₁₁NO₃10 mM77-86-1
氯化钾KCl50 mM7447-40-7
氯化镁MgCl₂1.5 mM7791-18-6
Triton X-100C₃₄H₆₂O₁₁0.1% (w/v)9002-93-1

灭菌与储存

  • 灭菌:0.22 μm过滤。
  • 储存:分装后-20 °C冷冻保存。

操作提示

  • 缓冲液pH通常为8.0–9.5,可通过Tris-Cl调节。
  • Triton X-100极粘稠,建议使用低浓度储备液,也可用Tween 20替代。
  • 使用KCl配制的PCR缓冲液时,MgCl₂浓度通常较低(约1.5 ± 0.25 mM)。
  • 最佳PCR缓冲液取决于所用DNA聚合酶类型,请遵循酶供应商推荐。
  • 直接使用无水氯化镁时会放热,建议少量多次加入部分溶剂中。
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