Tris-乙酸-EDTA (TAE) 缓冲液制备指南

本指南介绍了如何制备实验室使用的特定摩尔浓度的 Tris-乙酸-EDTA (TAE)。

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Tris-乙酸-EDTA(TAE)缓冲液是核酸电泳中最常用的缓冲体系之一,可提供稳定的 pH 环境并有效螯合二价金属离子。

Tris-acetate-EDTA(TAE)缓冲液 —— 1X 工作液成分

名称分子式浓度(1X)CAS
Tris baseC₄H₁₁NO₃40 mM77-86-1
冰醋酸CH₃CO₂H20 mM64-19-7
EDTAC₁₀H₁₆N₂O₈1 mM60-00-4

Tris-acetate-EDTA(TAE)缓冲液的常见用途

TAE 缓冲液广泛用于 DNA 和 RNA 的琼脂糖凝胶电泳。Tris 提供缓冲能力,乙酸调节溶液的离子强度与 pH,EDTA 螯合 Mg²⁺ 等二价金属离子,从而抑制核酸酶活性。TAE 缓冲液对大分子 DNA 片段具有较好的分辨率,常用于克隆、限制性酶切分析及常规核酸分离实验。

配制提示、灭菌与储存

  • 推荐使用 EDTA 溶液或二水 EDTA·2Na;
  • 有研究表明,使用 EDTA(游离酸)配制的缓冲液在电泳时产热更少,但配制耗时更长;
  • EDTA(游离酸)极难溶解(需 pH 8.0),建议先配制 EDTA 储备液;
  • 冰醋酸(100% 乙酸)的摩尔浓度约为 17.5 M;
  • 若出现少量沉淀,可置于 37°C 水浴中溶解,不影响使用;若水浴后仍有沉淀,请废弃该溶液;
  • 灭菌方式:通常无需灭菌,可根据实验需求自行选择;
  • 储存条件:室温。
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