Preparación del tampón DPBS
Esta guía describe la preparación de una solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco a una molaridad definida para uso en laboratorio.
La solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) es una solución salina tamponada con fosfato modificada, ampliamente utilizada en cultivo celular e investigación biológica, con pH y osmolaridad optimizados para células de mamíferos.
Solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) – Composición de la solución de trabajo 1X
| Nombre | Fórmula | Concentración (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Cloruro de sodio | NaCl | 137 mM | 7647-14-5 |
| Cloruro de potasio | KCl | 2.7 mM | 7447-40-7 |
| Fosfato monopotásico | KH₂PO₄ | 1.47 mM | 7778-77-0 |
| Fosfato disódico | Na₂HPO₄ | 8.1 mM | 7558-79-4 |
| Cloruro de magnesio (opcional) | MgCl₂ | 0.5 mM | 7786-30-3 |
| Cloruro de calcio (opcional) | CaCl₂ | 1 mM | 10043-52-4 |
Aplicaciones del DPBS
El DPBS se utiliza habitualmente para lavar células y tejidos, diluir muestras, transportar células y preparar reactivos en procedimientos de cultivo celular. En comparación con el PBS estándar, el DPBS está formulado para favorecer mejor a las células de mamíferos y se usa con frecuencia en procedimientos de disociación celular, tinción y microscopía.
Consejos de preparación, esterilización y almacenamiento
- En la práctica, el pH del DPBS 1X preparado con agua Milli-Q suele estar entre 7.2 y 7.4, y normalmente no es necesario ajustarlo.
- Si se requiere un control estricto del pH, medirlo y ajustarlo después de diluir a 1X.
- Almacenar DPBS concentrado a 4°C puede provocar la precipitación de sales. Agitar bien antes de usar; desechar si quedan partículas.
- El fosfato disódico anhidro es muy higroscópico; evitar la exposición prolongada durante el pesaje.
- La adición de cloruro de calcio y cloruro de magnesio debe determinarse según los requisitos experimentales.
- El CaCl₂ y el MgCl₂ anhidros liberan calor al disolverse; manipular con precaución.
- Esterilización: filtración de 0.22 μm o autoclavado.
- Almacenamiento: temperatura ambiente o 4 °C.
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