Preparo do tampão DPBS

A solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS) é uma solução salina tamponada com fosfato modificada, amplamente usada em cultura celular e pesquisa biológica, com pH e osmolaridade otimizados para células de mamíferos.

Solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS) – Composição da solução de trabalho 1X

Nome	Fórmula	Concentração (1X)	CAS
Cloreto de sódio	NaCl	137 mM	7647-14-5
Cloreto de potássio	KCl	2.7 mM	7447-40-7
Fosfato monopotássico	KH₂PO₄	1.47 mM	7778-77-0
Fosfato dissódico	Na₂HPO₄	8.1 mM	7558-79-4
Cloreto de magnésio (opcional)	MgCl₂	0.5 mM	7786-30-3
Cloreto de cálcio (opcional)	CaCl₂	1 mM	10043-52-4

Aplicações do DPBS

O DPBS é comumente usado para lavar células e tecidos, diluir amostras, transportar células e preparar reagentes em procedimentos de cultura celular. Em comparação com o PBS padrão, o DPBS é formulado para atender melhor às necessidades das células de mamíferos e é frequentemente usado em procedimentos de dissociação celular, coloração e microscopia.

Dicas de preparo, esterilização e armazenamento

Na prática, o pH do DPBS 1X preparado com água Milli-Q geralmente fica entre 7.2 e 7.4, e normalmente não é necessário ajustá-lo.
Se for necessário um controle rigoroso do pH, medi-lo e ajustá-lo após a diluição para 1X.
Armazenar DPBS concentrado a 4°C pode causar precipitação de sais. Agitar bem antes do uso; descartar se restarem partículas.
O fosfato dissódico anidro é altamente higroscópico; evitar exposição prolongada durante a pesagem.
A adição de cloreto de cálcio e cloreto de magnésio deve ser determinada pelos requisitos experimentais.
CaCl₂ e MgCl₂ anidros liberam calor ao se dissolverem; manusear com cuidado.
Esterilização: filtração de 0.22 μm ou autoclavagem.
Armazenamento: temperatura ambiente ou 4 °C.