Preparación de solución madre de Tris-Cl
Esta guía describe la preparación de una solución madre de Tris-Cl a una molaridad definida para uso en laboratorio.
Guía de preparación de solución madre – Tampón Tris (1 M, pH 7.2)
Tris (tris(hidroximetil)aminometano), también conocido como Trizma o THAM, es un tampón biológico ampliamente utilizado en biología molecular y bioquímica. Tiene un pKa de ~8.08 a 25 °C y un intervalo de tamponamiento eficaz entre ~7.2 y 9.0, lo que lo hace adecuado para aplicaciones a pH fisiológico. El pH de la solución depende de la temperatura y debe ajustarse a la temperatura prevista de uso.
Información química
| Nombre | Fórmula molecular | Masa molecular | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 121.14 g/mol | 77-86-1 |
Aplicaciones
- Tamponamiento biológico general entre pH 7.2–9.0
- Preparación de tampones TAE, TBE y TE
Solubilidad y manipulación
- Tris base es un polvo blanco que se disuelve fácilmente en agua.
- Como el pH cambia con la temperatura, ajustarlo a la temperatura a la que se utilizará el tampón.
Preparación de Tris.Cl de 1 M (pH 7.2)
- Pesar 121.14 g de Tris base y transferir a un vaso de precipitados o matraz de 1 L.
- Añadir ~800 mL de agua desionizada y disolver con agitación.
- Si se ha calentado, dejar enfriar la solución a temperatura ambiente. No ajustar el pH mientras esté caliente.
- Añadir lentamente HCl concentrado mientras se agita y se controla el pH. Dejar que la solución vuelva a la temperatura prevista para el ajuste del pH antes de realizar el ajuste final a pH 7.2. Determinar la cantidad de HCl según el pH medido, no según un volumen fijo.
- Transferir a una probeta graduada de 1 L y ajustar el volumen final a 1000 mL con agua desionizada.
- Opcional: esterilizar en autoclave durante 20 min a 15 psi si se requiere un tampón estéril.
Almacenamiento y notas
- Tris.Cl de 1 M a pH 7.2 es transparente e incoloro; desechar si está amarillento.
- Almacenar a temperatura ambiente durante varias semanas.
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