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储备溶液配制指南 —— Tris 缓冲液 (1 M, pH 7.2)
Tris（全称 Tris(hydroxymethyl)aminomethane），也称 Trizma 或 THAM，是分子生物学和生物化学中常用的缓冲剂。 Tris 的 pKa 在 25 °C 约为 8.08，在 pH 7.2–9.0 范围内具有良好的缓冲能力，适合生理 pH 环境。 Tris 缓冲液的 pH 随温度变化明显，应在使用时所处温度下调节。
化学信息
| 名称 | 分子式 | 分子量 | CAS 号 |
|---|---|---|---|
| Tris Base | C₄H₁₁NO₃ | 121.14 g/mol | 77-86-1 |
用途
- pH 7.2–9.0 的生物缓冲剂
- 制备 TAE、TBE 和 TE 缓冲液
溶解性与操作
- Tris Base 是白色粉末，易溶于水。
- 由于 pH 随温度显著变化，应在使用时的温度下调节 pH。
1 M Tris.Cl (pH 7.2) 配制
- 称取 121.14 g Tris Base 并置于 1 L 容器中。
- 加入约 800 mL 去离子水，搅拌使其完全溶解。
- 溶液冷却至室温后再调节 pH，避免热时调节。
- 缓慢加入浓盐酸 (≈ 45 mL)，监测 pH 至 7.2。
- 转移至 1 L 量筒，用去离子水定容至 1000 mL。
- 如需无菌，可高压灭菌 20 分钟。
储存与注意事项
- 1 M Tris.Cl pH 7.2 是澄清无色溶液；如变黄，建议重新配制。
- 可在室温下保存数周。
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