Preparación de solución madre de EGTA
Esta guía describe la preparación de una solución madre de EGTA a una molaridad definida para uso en laboratorio.
Guía de preparación de soluciones madre – EGTA
El EGTA (ácido etilenglicoltetraacético) es un quelante de iones calcio altamente selectivo utilizado en experimentos bioquímicos y de biología celular para controlar las concentraciones de Ca2+ libre. El EGTA se une a los iones calcio con mucha mayor afinidad que al magnesio, por lo que resulta útil en aplicaciones de tamponamiento y quelación que requieren secuestro específico de calcio.
Propiedades químicas
- Número CAS: 67-42-5
- Fórmula molecular: C14H24N2O10
- Masa molar: 380.35 g/mol
Solubilidad y manipulación
El EGTA es poco soluble en agua y normalmente requiere condiciones alcalinas (por ejemplo, añadir NaOH) para disolverse completamente. En la práctica, las soluciones madre se preparan primero en agua ajustada a pH básico para garantizar la disolución, o en pequeños volúmenes de NaOH concentrado seguidos de dilución.
- Soluble en soluciones acuosas alcalinas; puede precipitar si disminuye el pH.
- Solubilidad limitada en agua a pH neutro; el calentamiento y la sonicación pueden facilitar la solubilización.
Preparación de la solución madre
A continuación se indican volúmenes de ejemplo para preparar soluciones madre de EGTA con molaridades habituales. Ajuste las cantidades según la masa molar exacta del lote si es necesario.
5 mM: 0.53 mL por 1 mg
10 mM: 0.26 mL por 1 mg
Tras disolver, ajuste el pH si es necesario, complete hasta el volumen final con tampón o agua y esterilice la solución por filtración si hace falta.
Conservación y uso
- Las soluciones madre pueden dividirse en alícuotas y conservarse a 2-8°C durante varios meses.
- Evite ciclos repetidos de congelación–descongelación; prepare las diluciones de trabajo justo antes del uso.
- Utilice técnicas estériles y filtración para evitar contaminación en aplicaciones de cultivo celular.
Aplicaciones
El EGTA se utiliza habitualmente para quelar calcio en ensayos bioquímicos, preparar tampones con calcio controlado y modular los niveles de Ca2+ intracelulares o extracelulares en estudios de biología celular. Su alta selectividad por el calcio frente al magnesio lo hace especialmente útil cuando se requiere quelación diferencial de iones.
