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储备溶液配制指南 —— EGTA
EGTA(乙二醇四乙酸)是一种高度选择性的钙离子螯合剂,用于生化及细胞生物学实验中控制自由 Ca2+ 浓度。 与镁相比,EGTA 对钙的亲和力更高,因此常用于需要特异性螯合钙的缓冲体系中。
化学性质
- CAS 号:67-42-5
- 分子式:C14H24N2O10
- 分子量:380.35 g/mol
溶解性与操作注意事项
EGTA 在中性水中溶解度较低,通常需要加入碱性条件(例如 NaOH)来促使其完全溶解。 实际配制时,可先在碱性水中溶解粉末,然后用缓冲液或水稀释至目标体积。
- 在碱性条件下易溶;若 pH 降低可能出现沉淀。
- 在中性 pH 水中溶解性有限,可加热和超声辅助溶解。
储备溶液配制参考
下表为常用摩尔浓度的 EGTA 储备液示例体积,可据此调整配制量:
1 mM: 每 1 mg 约需 2.63 mL
5 mM: 每 1 mg 约需 0.53 mL
10 mM: 每 1 mg 约需 0.26 mL
5 mM: 每 1 mg 约需 0.53 mL
10 mM: 每 1 mg 约需 0.26 mL
溶解后如有需要调整 pH,并用缓冲液或去离子水定容,必要时进行无菌过滤。
储存与使用
- 储备液可分装后在 2-8°C 保存数月。
- 避免反复冻融;实验使用前再稀释为工作液。
- 细胞实验应使用无菌技术配制与保存。
应用场景
EGTA 常用于螯合钙离子、制备钙缓冲体系以及调控细胞内外 Ca2+ 浓度。 由于其对钙的高选择性,在需要区分钙与镁的实验中尤为有用。
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