Preparo do tampão TE

O tampão Tris-EDTA (TE) é um sistema tamponante amplamente usado para armazenar e estabilizar DNA e RNA, mantendo o pH e inibindo a atividade de nucleases.

Tampão Tris-EDTA (TE) – Composição da solução de trabalho 1X

Aplicações do tampão Tris-EDTA

O tampão Tris-EDTA é usado principalmente para armazenar, diluir e estabilizar DNA e RNA. O Tris mantém o pH estável, enquanto o EDTA quela íons metálicos divalentes, como Mg²⁺ e Ca²⁺, ajudando a inibir nucleases dependentes de metais. O EDTA não inibe de forma confiável RNases independentes de metais, como a RNase A. O tampão TE é amplamente usado em procedimentos de biologia molecular, como extração de ácidos nucleicos, clonagem, sequenciamento e preservação de DNA a longo prazo.

Dicas de preparo, esterilização e armazenamento

• A rigor, prefere-se pH 7.5 para RNA, enquanto pH 8.0 é comumente usado para DNA; porém, pH 8.0 geralmente é adequado para ambos.
• O pH das soluções de Tris é sensível à temperatura. Ajuste sempre o pH em temperatura ambiente.
• Recomenda-se verificar periodicamente o pH para garantir a estabilidade do tampão.
• A esterilização por filtração de 0.2 μm não garante a remoção ou inativação completa de todas as DNases.
• O DNA genômico e plasmidial pode ser armazenado por curto prazo em tampão TE a 4°C ou por longo prazo entre −20°C e −80°C. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
• O EDTA (ácido livre) é extremamente difícil de dissolver; recomenda-se preparar antecipadamente uma solução estoque de EDTA.
• Esterilização: autoclavagem.
• Armazenamento: temperatura ambiente.