Tris-EDTA (TE) 缓冲液制备指南

本指南介绍了如何制备实验室使用的特定摩尔浓度的 Tris-EDTA (TE)。

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Tris-EDTA(TE)缓冲液是分子生物学中最常用的缓冲体系之一,主要用于 DNA 和 RNA 的储存与稳定,通过维持 pH 并抑制核酸酶活性来保护核酸完整性。

Tris-EDTA(TE)缓冲液 —— 1X 工作液成分

名称分子式浓度(1X)CAS
Tris-Cl(pH 7.5 或 8.0)C₄H₁₁NO₃10 mM77-86-1
EDTAC₁₀H₁₆N₂O₈1 mM60-00-4

Tris-EDTA 缓冲液的常见用途

TE 缓冲液主要用于 DNA 和 RNA 的溶解、稀释与储存。Tris 用于维持稳定的 pH 环境,而 EDTA 通过螯合 Mg²⁺、Ca²⁺ 等二价金属离子,有效抑制 DNase 和 RNase 活性。TE 缓冲液广泛应用于核酸提取、克隆、测序及长期保存等分子生物学实验中。

配制提示、灭菌与储存

  • 严格意义上,RNA 通常使用 pH 7.5,而 DNA 常用 pH 8.0;但 pH 8.0 对 DNA 和 RNA 均较为安全;
  • Tris 溶液的 pH 对温度敏感,请在室温下调整;
  • 建议定期检查 pH 值,以确保缓冲液稳定性;
  • 注意 0.2 μm 过滤除菌无法确保彻底去除或灭活所有 DNase;
  • 基因组 DNA 和质粒 DNA 可在 4°C 下短期储存于 TE 中,或在 −20°C~−80°C 下长期储存,避免反复冻融;
  • EDTA(游离酸)极难溶解,建议先配制 EDTA 储备液;
  • 灭菌方式:高压蒸汽灭菌;
  • 储存条件:室温。
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