SDS-PAGE 上样缓冲液制备指南

本指南介绍了如何制备实验室使用的特定摩尔浓度的 SDS-PAGE 上样缓冲液。

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SDS-PAGE 上样缓冲液(Sample Buffer)用于蛋白样品上样前处理,提供变性、密度增加及示踪染料功能。

SDS-PAGE 上样缓冲液 —— 1X 工作液成分

名称分子式浓度(1X)CAS
Tris-Cl(pH 6.8)C₄H₁₁NO₃50 mM77-86-1
SDSC₁₂H₂₅O₄NaS2% (w/v)151-21-3
溴酚蓝C₁₉H₁₀Br₄O₅S0.1% (w/v)115-39-9
甘油C₃H₈O₃10% (v/v)56-81-5
β-巯基乙醇(使用前添加)C₂H₆OS1% (v/v)60-24-2

SDS-PAGE 上样缓冲液的用途

SDS-PAGE 上样缓冲液用于使蛋白充分变性并带上均一负电荷,同时增加样品密度以利上样,并通过示踪染料监控电泳进程。

配制提示、灭菌与储存

  • 可在配制时直接加入还原剂并于 −20°C 保存,但还原剂随时间可能失效,增加出现“鬼带”的风险;
  • 进行还原型 SDS-PAGE 时,建议在使用前加入 β-巯基乙醇,使其最终浓度为 1% (v/v),加入后缓冲液有效期约为 1 个月;
  • β-巯基乙醇具有毒性且气味刺鼻,请注意安全防护;
  • SDS-PAGE 上样缓冲液配方多样,可按需调整,例如用 100 mM DTT 替代 1% (v/v) β-巯基乙醇;
  • SDS 在低温下可能形成絮状物,使用前请确保完全溶解;
  • 灭菌方式:通常无需灭菌,请自行选择;
  • 储存条件:室温;若预先加入还原剂,建议 −20°C 分装保存。
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