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SDS-PAGE 上样缓冲液(Sample Buffer)用于蛋白样品上样前处理,提供变性、密度增加及示踪染料功能。
SDS-PAGE 上样缓冲液 —— 1X 工作液成分
| 名称 | 分子式 | 浓度(1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl(pH 6.8) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 2% (w/v) | 151-21-3 |
| 溴酚蓝 | C₁₉H₁₀Br₄O₅S | 0.1% (w/v) | 115-39-9 |
| 甘油 | C₃H₈O₃ | 10% (v/v) | 56-81-5 |
| β-巯基乙醇(使用前添加) | C₂H₆OS | 1% (v/v) | 60-24-2 |
SDS-PAGE 上样缓冲液的用途
SDS-PAGE 上样缓冲液用于使蛋白充分变性并带上均一负电荷,同时增加样品密度以利上样,并通过示踪染料监控电泳进程。
配制提示、灭菌与储存
- 可在配制时直接加入还原剂并于 −20°C 保存,但还原剂随时间可能失效,增加出现“鬼带”的风险;
- 进行还原型 SDS-PAGE 时,建议在使用前加入 β-巯基乙醇,使其最终浓度为 1% (v/v),加入后缓冲液有效期约为 1 个月;
- β-巯基乙醇具有毒性且气味刺鼻,请注意安全防护;
- SDS-PAGE 上样缓冲液配方多样,可按需调整,例如用 100 mM DTT 替代 1% (v/v) β-巯基乙醇;
- SDS 在低温下可能形成絮状物,使用前请确保完全溶解;
- 灭菌方式:通常无需灭菌,请自行选择;
- 储存条件:室温;若预先加入还原剂,建议 −20°C 分装保存。
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