SDS-PAGE 上樣緩衝液配製指南

本指南介紹如何製備實驗室使用的特定摩爾濃度的SDS-PAGE 上樣緩衝液。

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SDS-PAGE 上樣緩衝液(Sample Buffer)用於蛋白樣品上樣前處理,提供變性、密度增加與示蹤染料功能。

SDS-PAGE 上樣緩衝液 —— 1X 工作液成分

名稱分子式濃度(1X)CAS
Tris-Cl(pH 6.8)C₄H₁₁NO₃50 mM77-86-1
SDSC₁₂H₂₅O₄NaS2% (w/v)151-21-3
溴酚藍C₁₉H₁₀Br₄O₅S0.1% (w/v)115-39-9
甘油C₃H₈O₃10% (v/v)56-81-5
β-巯基乙醇(使用前添加)C₂H₆OS1% (v/v)60-24-2

SDS-PAGE 上樣緩衝液的用途

SDS-PAGE 上樣緩衝液可使蛋白質完全變性並帶上均一負電荷,同時增加樣品密度以利上樣,並透過示蹤染料監控電泳進程。

配製提示、滅菌與儲存

  • 可於配製時直接加入還原劑並於 −20°C 保存,但還原劑可能隨時間失效,增加出現「鬼帶」的風險;
  • 進行還原型 SDS-PAGE 時,建議於使用前加入 β-巯基乙醇,使其最終濃度為 1% (v/v),加入後緩衝液有效期約為 1 個月;
  • β-巯基乙醇具毒性且氣味刺鼻,請注意安全防護;
  • SDS-PAGE 上樣緩衝液配方多樣,可依需求調整,例如以 100 mM DTT 取代 1% (v/v) β-巯基乙醇;
  • SDS 於低溫下可能形成絮狀物,使用前請確認完全溶解;
  • 滅菌方式:通常不需滅菌,請自行選擇;
  • 儲存條件:室溫;若預先加入還原劑,建議 −20°C 分裝保存。
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