HEPES 储备液配制指南

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储备溶液配制指南 —— HEPES 缓冲液

HEPES（4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸）是一种常用的 Good’s 缓冲剂，广泛用于细胞培养和生物化学实验。 HEPES 在 25 °C 时的 pKa 约为 7.5，可在 pH 6.8–8.2 范围内有效缓冲，适合生理 pH 条件。HEPES 缓冲溶液在水中可高溶解且与金属离子结合很少。

化学信息

用途

• 生物缓冲剂，用于细胞培养和生化实验
• 维持生理 pH 条件下的缓冲
• 酶学实验、电泳缓冲体系等

1 M HEPES 储备液配制（pH ~7.5）

1. 称取 238.30 g HEPES（游离酸）。
2. 加入约 800 mL 去离子水并搅拌溶解。
3. 用校准过的 pH 计缓慢滴加强碱（如 NaOH）调节 pH 至所需值（如 ~7.5）。
4. 调好 pH 后转移至 1 L 量筒并加水定容至 1000 mL。
5. 如需无菌可用 0.22 µm 滤膜过滤。

储存与使用

• HEPES 储备液透明无色，可在 4 °C 或室温短期保存。
• 使用时按实验需求稀释至工作浓度，例如 10–25 mM。