HEPES 儲備溶液配製指南

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儲備溶液配製指南 —— HEPES 緩衝液

HEPES（4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸）是一種常用的 Good’s 緩衝劑，廣泛應用於細胞生物學和生化實驗。 在 25 °C 時 pKa 約為 7.5，可在 pH 6.8–8.2 範圍內有效緩衝，適合生理 pH 條件。HEPES 在水中高度可溶，且對金屬離子影響小。

化學資訊

用途

• 生物緩衝劑，用於細胞培養及生化實驗
• 維持生理 pH 緩衝條件
• 酶學實驗及電泳等

1 M HEPES 儲備液配製（pH ~7.5）

1. 稱取 238.30 g HEPES（遊離酸）。
2. 加入約 800 mL 去離子水並攪拌溶解。
3. 使用校準過的 pH 計，緩慢滴加 NaOH 使 pH 達到 ~7.5。
4. 調整好 pH 後轉移至 1 L 量筒，用水定容至 1000 mL。
5. 如需無菌應用，可用 0.22 µm 滤膜过滤。

儲存與使用

• HEPES 緩衝溶液透明無色，可在 4 °C 或室溫短期儲存。
• 按實驗需求稀释到工作濃度，例如 10–25 mM。