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儲備溶液配製指南 —— 0.2 M 正釩酸鈉(Na₃VO₄)溶液
正釩酸鈉(Na₃VO₄)在生化實驗中作為**磷酸酶抑制劑**常用。通常配製為**200 mM(0.2 M)母液**。為了獲得最大活性,需通過調節 pH 和反覆加熱除去聚合釩酸根,使溶液在 pH 10 保持無色和穩定。
實驗目的
配製 **20 mL 0.2 M** 正釩酸鈉儲備溶液,用於細胞裂解緩衝液或酶學實驗。
儲備溶液組成
- 0.2 M 正釩酸鈉(Na₃VO₄)水溶液
操作材料
- 正釩酸鈉固體
- 6 M 鹽酸(HCl)
- 去離子水 / Milli‑Q 水
- 50 mL 帶蓋聚丙烯管
- 微波爐或沸水浴
- pH 計或 pH 試紙
- 量管 / 微量移液器
- 個人防護裝備
操作步驟
- 步驟1
稱取 **0.736 g** 正釩酸鈉置於 50 mL 帶蓋管中,加入 **15 mL** 水,顛倒混合使其溶解。 - 步驟2
用 6 M 鹽酸調節 pH 至 **10.0**(每次約 10 µL),溶液初始 pH 約 13.5,調節時可能呈黃色。 - 步驟3
將溶液置於沸水浴或微波加熱至無色,然後冷卻。 - 步驟4
冷卻後再度調至 pH 10,重複加熱/冷卻循環 **2–3 次**,使溶液穩定且無色。 - 步驟5
定容至 **20 mL**,顛倒混合均勻。
注意:反覆調 pH 和加熱可使聚合釩酸根去除,得到穩定母液。請在容器上標示濃度、pH 和製備日期,分裝並於 **‑20 °C** 保存。如溶液變色或 pH 不穩定,請丟棄。
可用試劑
| 名稱 | 分子式 | 分子量 | CAS |
|---|---|---|---|
| 正釩酸鈉 | Na₃VO₄ | 183.91 | 13721‑39‑6 |
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