Preparación de solución madre de IPTG
Esta guía describe la preparación de una solución madre de IPTG a una molaridad definida para uso en laboratorio.
Guía de preparación de soluciones madre – IPTG
El IPTG (isopropil β-D-1-tiogalactopiranósido) es un análogo de la lactosa ampliamente utilizado en biología molecular para inducir la expresión de proteínas recombinantes en E. coli bajo el control de promotores lac o tac. El IPTG se une al represor lac, lo libera del operador lac y permite la transcripción de los genes posteriores. También se utiliza para la selección azul/blanco en clonación.
Información química
| Nombre | Fórmula molecular | Masa molar | CAS |
|---|---|---|---|
| IPTG | C₉H₁₈O₅S | 238.3 g/mol | 367-93-1 |
Aplicaciones
- Inducción de la expresión de proteínas en E. coli
- Identificación de clones positivos mediante selección azul/blanco
Solubilidad y manipulación
- El IPTG se suministra como polvo cristalino blanco que se disuelve fácilmente en agua.
- Prepare las soluciones madre con agua libre de nucleasas y técnicas estériles.
- Nunca autoclave las soluciones de IPTG; el calor puede degradar el compuesto.
Preparación de la solución madre
Para preparar una solución madre de IPTG de 1 M:
Pese 2.38 g de IPTG en polvo y añada a ~8 mL de agua desionizada.
Mezcle hasta disolver completamente.
Añada agua desionizada hasta un volumen final de 10 mL y mezcle bien.
Mezcle hasta disolver completamente.
Añada agua desionizada hasta un volumen final de 10 mL y mezcle bien.
Esterilización y conservación
- Esterilice por filtración con un filtro de 0.22 µm en un recipiente estéril.
- Divida la solución madre en alícuotas pequeñas (p. ej., 0.5–1 mL) para evitar ciclos repetidos de congelación–descongelación.
- Conserve las alícuotas a −20 °C para uso a largo plazo.
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