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儲備溶液配製指南 —— IPTG
IPTG(異丙基 β-D-1-硫代半乳糖苷)是一種乳糖類似物,在分子生物學實驗中常用於誘導大腸桿菌中重組蛋白的表達。 IPTG 可結合 lac 抑制子,使其從 lac 操縱子上釋放,從而允許 RNA 聚合酶轉錄下游基因。它也常用於分子克隆中的藍白篩選。
化學資訊
| 名稱 | 分子式 | 分子量 | CAS 號 |
|---|---|---|---|
| IPTG | C₉H₁₈O₅S | 238.3 g/mol | 367-93-1 |
用途
- 誘導大腸桿菌蛋白表達
- 藍白篩選識別陽性克隆
溶解性與操作
- IPTG 為白色結晶粉末,易溶於水。
- 使用無核酸酶水和無菌方法配製儲備液。
- 不要高壓滅菌 IPTG 溶液;高溫會破壞分子。
儲備液配製
配製 1 M IPTG 儲備液:
稱取 2.38 g IPTG 粉末並加入約 8 mL 去離子水。
混合直至完全溶解。
加水定容至 10 mL 並徹底混合。
混合直至完全溶解。
加水定容至 10 mL 並徹底混合。
無菌與儲存
- 通過 0.22 µm 濾膜滅菌過濾。
- 將儲備液分裝為小份(如 0.5–1 mL)以避免反覆凍融。
- 在 −20 °C 下長期保存。
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