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储备溶液配制指南 —— IPTG
IPTG(异丙基 β-D-1-硫代半乳糖苷)是一种乳糖类似物,在分子生物学实验中常用于诱导大肠杆菌中重组蛋白的表达。 IPTG 能结合 lac 抑制子,使其从 lac 操纵子上释放,从而允许 RNA 聚合酶转录下游基因。它也常用于分子克隆中的蓝白筛选。
化学信息
| 名称 | 分子式 | 分子量 | CAS 号 |
|---|---|---|---|
| IPTG | C₉H₁₈O₅S | 238.3 g/mol | 367-93-1 |
用途
- 诱导大肠杆菌蛋白表达
- 蓝白筛选识别阳性克隆
溶解性与操作
- IPTG 为白色结晶粉末,易溶于水。
- 使用无核酸酶水和无菌方法配制储备液。
- 勿高压灭菌 IPTG 溶液;高温会破坏分子。
储备液配制
配制 1 M IPTG 储备液:
称取 2.38 g IPTG 粉末并加入约 8 mL 去离子水。
混匀直至完全溶解。
加水定容至 10 mL 并彻底混合。
混匀直至完全溶解。
加水定容至 10 mL 并彻底混合。
无菌与储存
- 通过 0.22 µm 滤膜无菌过滤。
- 将储备液分装为小份(如 0.5–1 mL)以避免反复冻融。
- 在 −20 °C 下长期保存。
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