Preparación de solución madre de PIPES
Esta guía describe la preparación de una solución madre de PIPES a una molaridad definida para uso en laboratorio.
Guía de preparación de solución madre – PIPES
PIPES (ácido piperazina-N,N′-bis(2-etanosulfónico) y sus formas de sales sódicas son tampones de Good zwitteriónicos utilizados habitualmente en experimentos de bioquímica y biología celular. PIPES actúa eficazmente en un intervalo de pH aproximado de 6.1–7.5 y presenta interacción mínima con iones metálicos divalentes, por lo que es adecuado para aplicaciones tampón donde la neutralidad iónica es importante.
Información química
- Número CAS: 5625-37-6
- Fórmula molecular: C₈H₁₈N₂O₆S₂
- Formas salinas comunes: PIPES·2Na, PIPES·Na, PIPES·1.5Na, PIPES (ácido libre)
- Masas moleculares: Varían según la forma salina (p. ej., ácido libre 302.38 g/mol, sal disódica 346.33 g/mol). Consultar la lista de reactivos para más detalles.
Propiedades y usos del tampón
- PIPES es un tampón biológico zwitteriónico con capacidad tamponante útil en condiciones cercanas a la neutralidad.
- No quela significativamente los iones metálicos, lo que resulta útil en experimentos con cationes divalentes.
- Se utiliza en purificación de proteínas, cromatografía, medios de cultivo celular y soluciones de fijación para microscopía.
Solubilidad y manipulación
- La forma de ácido libre tiene solubilidad limitada en agua y suele requerir un ajuste de pH con NaOH para disolverse eficazmente.
- Las formas de sales sódicas son más solubles y prácticas para preparar directamente el tampón.
- Las soluciones tampón PIPES pueden esterilizarse por filtración si se requiere para cultivo celular.
Preparación de la solución madre
Para preparar una solución madre de tampón PIPES de molaridad específica:
Para 1 L de tampón PIPES de 1.0 M (ácido libre):
• Añadir 302.37 g de PIPES ácido libre a ~800 mL de agua desionizada.
• Añadir lentamente NaOH (p. ej., 5–10 N) mientras se agita para disolver y ajustar al pH objetivo (normalmente ~6.8).
• Una vez disuelto y ajustado el pH, completar con agua hasta un volumen final de 1 L.
• Añadir 302.37 g de PIPES ácido libre a ~800 mL de agua desionizada.
• Añadir lentamente NaOH (p. ej., 5–10 N) mientras se agita para disolver y ajustar al pH objetivo (normalmente ~6.8).
• Una vez disuelto y ajustado el pH, completar con agua hasta un volumen final de 1 L.
Como alternativa, mezclar cantidades equimolares de sales monosódicas y disódicas de PIPES y titular hasta el pH deseado.
Almacenamiento y uso
- Almacenar los reactivos PIPES sólidos en seco a temperatura ambiente; las soluciones tampón pueden conservarse refrigeradas.
- Esterilizar las soluciones tampón por filtración cuando se requiera para aplicaciones biológicas sensibles.
Reactivos disponibles
| Nombre | Fórmula molecular | Masa molecular (g/mol) | CAS |
|---|---|---|---|
| PIPES·2Na | C₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂ | 346.33 | 76836-02-7 |
| PIPES·Na | C₈H₁₇N₂O₆S₂Na | 324.35 | 10010-67-0 |
| PIPES·1.5Na | C₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅ | 335.34 | 100037-69-2 |
| PIPES (ácido libre) | C₈H₁₈N₂O₆S₂ | 302.38 | 5625-37-6 |
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