Préparation d'une solution mère de PIPES
Ce guide décrit la préparation d'une solution mère de PIPES à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Guide de préparation de solution mère – PIPES
Le PIPES (acide pipérazine-N,N′-bis(2-éthanesulfonique) et ses formes salines sodiques sont des tampons de Good zwitterioniques couramment utilisés en biochimie et en biologie cellulaire. Le PIPES est efficace dans une plage de pH d’environ 6.1–7.5 et interagit très peu avec les ions métalliques divalents, ce qui convient aux applications tampons où la neutralité ionique est importante.
Informations chimiques
- Numéro CAS : 5625-37-6
- Formule moléculaire : C₈H₁₈N₂O₆S₂
- Formes salines courantes : PIPES·2Na, PIPES·Na, PIPES·1.5Na, PIPES (acide libre)
- Masses moléculaires : Variables selon la forme saline (p. ex., acide libre 302.38 g/mol, sel disodique 346.33 g/mol). Voir la liste des réactifs pour les détails.
Propriétés et utilisations du tampon
- Le PIPES est un tampon biologique zwitterionique offrant une capacité tampon utile près de la neutralité.
- Il ne chélate pas significativement les ions métalliques, ce qui est utile pour les expériences contenant des cations divalents.
- Utilisé pour la purification des protéines, la chromatographie, les milieux de culture cellulaire et les solutions de fixation pour la microscopie.
Solubilité et manipulation
- La forme acide libre est peu soluble dans l’eau et nécessite généralement un ajustement du pH avec NaOH pour se dissoudre efficacement.
- Les formes salines sodiques sont plus solubles et pratiques pour préparer directement le tampon.
- Les solutions tampons PIPES peuvent être stérilisées par filtration si nécessaire pour la culture cellulaire.
Préparation de la solution mère
Pour préparer une solution mère de tampon PIPES de molarité donnée :
Pour 1 L de tampon PIPES à 1.0 M (acide libre) :
• Ajouter 302.37 g de PIPES acide libre à ~800 mL d’eau désionisée.
• Ajouter lentement NaOH (p. ex., 5–10 N) sous agitation pour dissoudre et ajuster au pH cible (généralement ~6.8).
• Après dissolution et ajustement du pH, compléter à un volume final de 1 L avec de l’eau.
• Ajouter 302.37 g de PIPES acide libre à ~800 mL d’eau désionisée.
• Ajouter lentement NaOH (p. ex., 5–10 N) sous agitation pour dissoudre et ajuster au pH cible (généralement ~6.8).
• Après dissolution et ajustement du pH, compléter à un volume final de 1 L avec de l’eau.
Autre possibilité : mélanger des quantités équimolaires de sels monosodique et disodique de PIPES et titrer jusqu’au pH souhaité.
Conservation et utilisation
- Conserver les réactifs PIPES solides au sec à température ambiante ; les solutions tampons peuvent être conservées au réfrigérateur.
- Stériliser les solutions tampons par filtration si nécessaire pour des applications biologiques sensibles.
Réactifs disponibles
| Nom | Formule moléculaire | Masse moléculaire (g/mol) | CAS |
|---|---|---|---|
| PIPES·2Na | C₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂ | 346.33 | 76836-02-7 |
| PIPES·Na | C₈H₁₇N₂O₆S₂Na | 324.35 | 10010-67-0 |
| PIPES·1.5Na | C₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅ | 335.34 | 100037-69-2 |
| PIPES (acide libre) | C₈H₁₈N₂O₆S₂ | 302.38 | 5625-37-6 |
Aperçu
