Preparo de solução estoque de PIPES

Este guia descreve o preparo de uma solução estoque de PIPES em uma molaridade definida para uso em laboratório.

Guia de preparo de solução estoque – PIPES

PIPES (ácido piperazina-N,N′-bis(2-etanossulfônico) e suas formas de sais de sódio são tampões de Good zwitteriônicos comumente usados em experimentos de bioquímica e biologia celular. PIPES atua eficazmente na faixa de pH de aproximadamente 6.1–7.5 e apresenta interação mínima com íons metálicos divalentes, sendo adequado para aplicações de tamponamento nas quais a neutralidade iônica é importante.

Informações químicas

  • Número CAS: 5625-37-6
  • Fórmula molecular: C₈H₁₈N₂O₆S₂
  • Formas salinas comuns: PIPES·2Na, PIPES·Na, PIPES·1.5Na, PIPES (ácido livre)
  • Massas moleculares: Variam conforme a forma salina (por exemplo, ácido livre 302.38 g/mol, sal dissódico 346.33 g/mol). Consulte a lista de reagentes para detalhes.

Propriedades e usos do tampão

  • PIPES é um tampão biológico zwitteriônico com capacidade útil de tamponamento de pH em condições próximas da neutralidade.
  • Não quela significativamente íons metálicos, sendo útil para experimentos com cátions divalentes.
  • Usado na purificação de proteínas, cromatografia, meios de cultura celular e soluções de fixação para microscopia.

Solubilidade e manuseio

  • A forma de ácido livre tem solubilidade limitada em água e geralmente requer ajuste de pH com NaOH para dissolver eficazmente.
  • As formas de sais de sódio são mais solúveis e práticas para o preparo direto do tampão.
  • As soluções tampão PIPES podem ser esterilizadas por filtração se necessário para cultura celular.

Preparo da solução estoque

Para preparar uma solução estoque de tampão PIPES com molaridade específica:

Para 1 L de tampão PIPES a 1.0 M (ácido livre):
• Adicionar 302.37 g de PIPES ácido livre a ~800 mL de água deionizada.
• Adicionar lentamente NaOH (por exemplo, 5–10 N) sob agitação para dissolver e ajustar ao pH desejado (geralmente ~6.8).
• Após dissolver e ajustar o pH, completar com água até o volume final de 1 L.

Como alternativa, misturar quantidades equimolares dos sais monossódico e dissódico de PIPES e titular até o pH desejado.

Armazenamento e uso

  • Armazenar os reagentes PIPES sólidos em local seco à temperatura ambiente; as soluções tampão podem ser armazenadas sob refrigeração.
  • Esterilizar as soluções tampão por filtração quando necessário para aplicações biológicas sensíveis.

Reagentes disponíveis

NomeFórmula molecularMassa molecular (g/mol)CAS
PIPES·2NaC₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂346.3376836-02-7
PIPES·NaC₈H₁₇N₂O₆S₂Na324.3510010-67-0
PIPES·1.5NaC₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅335.34100037-69-2
PIPES (ácido livre)C₈H₁₈N₂O₆S₂302.385625-37-6
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