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儲備溶液配製指南 —— PIPES
PIPES(哌嗪-2,4-雙(2-乙烷磺酸) 及其鈉鹽形式)是常用的兩性離子 Good’s 緩衝劑, 在生化和細胞生物學實驗中廣泛使用。PIPES 緩衝能力適用於約 pH 6.1–7.5 且對二價金屬離子 幾乎不形成絡合物,非常適合要求離子中性緩衝的應用。
化學資訊
- CAS 號:5625-37-6
- 分子式:C₈H₁₈N₂O₆S₂
- 常見鹽形式:PIPES·2Na、PIPES·Na、PIPES·1.5Na、PIPES(游離酸)
- 分子量:因鹽形式不同而異(如游離酸約 302.38 g/mol,二鈉鹽約 346.33 g/mol)。
緩衝劑特性與用途
- PIPES 是一種兩性離子緩衝劑,在接近中性 pH 下具有良好緩衝效能。
- 對金屬離子幾乎不形成絡合物,適用於含二價金屬離子的緩衝體系。
- 用於蛋白質純化、層析、細胞培養培基以及顯微鏡固定液等緩衝溶液。
溶解性與操作注意事項
- 游離酸形式在水中溶解性較差,通常需加入 NaOH 逐滴調 pH 才能溶解。
- 鈉鹽形式溶解性更好,適合作為緩衝液配製的首選。
- 如用於細胞培養等應用,請對緩衝液進行無菌過濾。
儲備溶液配製
以下為常見莫耳濃度的 PIPES 緩衝液配製示例:
示例(1.0 M PIPES,游離酸形式):
• 稱取 302.37 g PIPES 游離酸,加約 800 mL 去離子水。
• 攪拌過程中逐滴加入 NaOH(如 5–10 N)調整 pH 並使其溶解,目標 pH 約 6.8。
• 溶解並調整 pH 後,以水定容至 1 L。
• 稱取 302.37 g PIPES 游離酸,加約 800 mL 去離子水。
• 攪拌過程中逐滴加入 NaOH(如 5–10 N)調整 pH 並使其溶解,目標 pH 約 6.8。
• 溶解並調整 pH 後,以水定容至 1 L。
或可按等莫耳比例混合單鈉鹽與二鈉鹽並調整 pH。
儲存與使用
- 固體 PIPES 試劑請干燥保存於室溫;緩衝液儲備可冷藏保存。
- 使用於敏感生物實驗時,請對緩衝液進行無菌過濾。
可用試劑資訊
| 名稱 | 分子式 | 分子量 (g/mol) | CAS 號 |
|---|---|---|---|
| PIPES·2Na | C₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂ | 346.33 | 76836-02-7 |
| PIPES·Na | C₈H₁₇N₂O₆S₂Na | 324.35 | 10010-67-0 |
| PIPES·1.5Na | C₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅ | 335.34 | 100037-69-2 |
| PIPES(游離酸) | C₈H₁₈N₂O₆S₂ | 302.38 | 5625-37-6 |
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