PIPES 储备液配制指南

本指南介绍了如何制备实验室使用的特定摩尔浓度的PIPES储备溶液。

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储备溶液配制指南 —— PIPES

PIPES(哌嗪-2,4-双(2-乙烷磺酸)及其钠盐形式)是常用于生物化学和细胞生物学实验的两性离子 Good’s 缓冲剂。 PIPES 在约 pH 6.1–7.5 范围内具有良好的缓冲能力,且对二价金属离子几乎不形成络合物,适合含金属离子的缓冲体系。

化学信息

  • CAS 号:5625-37-6
  • 分子式:C₈H₁₈N₂O₆S₂
  • 常见盐形式:PIPES·2Na、PIPES·Na、PIPES·1.5Na、PIPES(游离酸)
  • 分子量:因盐形式不同而异(如游离酸约 302.38 g/mol,二钠盐约 346.33 g/mol)。具体见试剂表。

缓冲剂特性与用途

  • PIPES 是一种两性离子缓冲剂,在中性附近的 pH 条件下具有良好的缓冲能力。
  • 其对金属离子几乎不形成络合物,适用于含二价金属离子的体系。
  • 用于蛋白质纯化、层析、细胞培养培养基及显微镜固定液等缓冲体系。

溶解性与操作注意事项

  • 游离酸形式在水中溶解性较差,通常需要逐滴加入 NaOH 来提高 pH 使其溶解。
  • 钠盐形式溶解性更好,更适合直接用于缓冲液配制。
  • 使用时,如需在细胞培养中应用,请无菌过滤缓冲液。

储备溶液配制

配制特定摩尔浓度的 PIPES 缓冲液储备液示例:

示例(1.0 M PIPES,游离酸形式):
• 称取 302.37 g PIPES 游离酸,加入约 800 mL 去离子水。
• 搅拌过程中缓慢滴加 NaOH(如 5–10 N)调 pH 并促使溶解,目标 pH ~6.8。
• 溶解且 pH 调整完毕后,用水定容至 1 L。

也可按等摩尔比例混合 PIPES 单钠盐和二钠盐再调 pH。

储存与使用

  • 固体 PIPES 请干燥保存于室温;缓冲液储备可冷藏保存。
  • 需要用于敏感生物实验时,请无菌过滤。

可用试剂信息

名称分子式分子量 (g/mol)CAS 号
PIPES·2NaC₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂346.3376836-02-7
PIPES·NaC₈H₁₇N₂O₆S₂Na324.3510010-67-0
PIPES·1.5NaC₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅335.34100037-69-2
PIPES(游离酸)C₈H₁₈N₂O₆S₂302.385625-37-6
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